Hispaania väed hõivavad Pedro Menéndez de Avilési alluvuses Prantsuse Huguenot 'asula Fort Caroline'is Florida tänapäeva Jacksonville'i lähedal. Rene Goulaine de Laudonniere'i juhtimisel kaotasid prantslased 135 meest, kes olid Ameerikas Euroopa võimude vahel koloonia sõjas. Enamik tapetuist hukati Avilese korraldusel, kes väidetavalt riputas tapetu puudele sildi "Mitte prantslaste, vaid ketseritena" kõrvale. Laudonniere ja veel umbes 40 huuenotot pääsesid põgenema.
Aastal 1564 olid Prantsuse hugenotid (protestandid) asunud mai pankadesse, mis oli Florida ranniku strateegiline punkt. Hispaania kuningas Philip II häiris see väljakutse Hispaania ametivõimudele Uues Maailmas ja ta saatis Pedro Menéndez de Avilési Floridasse, et saata välja Prantsusmaa ketserid ja asutada sinna Hispaania koloonia. 1565. aasta septembri alguses rajas Aviles Florida rannikule San Augustini, millest hiljem kasvab Põhja-Ameerika vanim linn Saint Augustine. Kaks nädalat hiljem, 20. septembril ründas ta ja hävitas Prantsuse Fort Caroline'i asula.
Prantsuse otsustav lüüasaamine julgustas Prantsusmaad oma koloniaalpüüdlused ümber suunama kaugele põhja poole jäävasse Ameerikasse, mis praegu on Quebecis ja Kanadas Nova Scotias.